實驗室改造完成的第三天,易新亮團隊迎來了第一個重要時刻。清晨七點,所有人己經聚集在新落成的潔淨室外的更衣區,空氣中瀰漫著消毒液特有的清冽氣息。
“記住流程。”林小雨一邊說著,一邊示範七步洗手法,“手腕、手背、指縫、指尖,每個部位都不能遺漏。”
張悅認真地模仿著每一個動作,額頭上滲出細密的汗珠。經過在李教授實驗室為期兩週的強化培訓,他們基本掌握了幹細胞培養的無菌操作規範,但今天畢竟是第一次在自己的實驗室獨立操作。
趙坤除錯著生物安全櫃:“風速0.5米每秒,壓差正常,可以開始。”
易新亮深吸一口氣,目光投向操作檯上那個密封的取樣箱。裡面裝著從志願者髂骨穿刺獲取的骨髓樣本,那是他們探索幹細胞治療之路的起點。
“開始吧。”易新亮說。
林小雨率先進入風淋室,經過三十秒的強風除塵後,穿著無菌服的她走進了潔淨室。張悅緊隨其後。透過觀察窗,易新亮能看到她們每一個動作都透著小心翼翼的鄭重。
骨髓樣本被取出,暗紅色的液體在取樣管中微微晃動。林小雨用移液器吸取適量樣本,轉移到離心管中。她的動作流暢而穩定,這是經過無數次練習的結果。
“加入等量PBS緩衝液。”張悅輕聲提醒,同時遞過準備好的試劑。
離心機開始運轉,低沉的嗡鳴聲在潔淨室內迴盪。十分鐘後,樣本分層完畢。林小雨小心地吸取上清液,留下底部的細胞沉澱。
“接下來是重懸和過濾。”張悅開啟細胞篩網,協助林小雨將細胞懸液過濾到新的培養瓶中。
易新亮在觀察記錄表上寫下時間點:“10:15,完成原代細胞分離。”
接下來的步驟是接種。林小雨將細胞懸液分裝到三個培養皿中,加入特製的培養基,然後輕輕搖晃,使細胞均勻分佈。
“完成接種。”林小雨的聲音透過對講系統傳來,“己放入二氧化碳培養箱,溫度37度,溼度95%,二氧化碳濃度5%。”
易新亮看了看時間:“好,接下來就是等待了。”
幹細胞培養最考驗耐心的就是等待。原代細胞需要24到48小時才能貼壁,而要形成足夠的細胞數量進行後續實驗,至少需要一週時間。
第二天清晨,易新亮第一個來到實驗室。他輕輕開啟培養箱,取出一個培養皿放在倒置顯微鏡下。
鏡頭下的景象讓他屏住了呼吸——一些梭形的細胞己經開始貼壁,它們伸展出細長的突起,像初生的嫩芽般附著在培養皿底部。這就是間充質幹細胞,具有多向分化潛能的“萬能細胞”。
“太美了。”不知何時,林小雨也來到了他身邊,“你看它們的形態,多麼優雅。”
張悅也湊過來觀察:“根據文獻,這些細胞可以分化為成骨細胞、脂肪細胞、軟骨細胞...幾乎所有的間充質組織。”
接下來的幾天,團隊輪流觀察細胞的生長情況。每天,細胞都在發生變化——數量增多,形態更加典型,逐漸形成漩渦狀的生長模式。
到了第七天,細胞己經長滿培養皿底部的80%,達到了傳代的標準。
“第一次傳代要特別小心。”易新亮提醒道,“間充質幹細胞很嬌氣,消化時間不能太長。”
林小雨負責操作。她先吸掉舊培養基,用PBS緩衝液輕輕沖洗細胞,然後加入胰蛋白酶消化液。
“開始計時。”張悅盯著秒錶。
消化過程必須在顯微鏡下密切觀察。太短,細胞無法從培養皿底部脫落;太長,則會損傷細胞膜。
“一分鐘...細胞開始變圓。”林小雨彙報著觀察結果。








