在成功研究出促進類器官內血管生成的方案後，易新亮團隊面臨著一個新的問題：移植後的血管網路形成需要時間，而在這段空窗期內，類器官中心區域常因缺氧和營養不足而出現細胞死亡。為了解決這個問題，團隊開始專注於預血管化技術——在體外培養階段就預先誘導類器官內部形成功能性的血管網路。
“如果我們能在移植前就讓類器官擁有成熟的血管網路，那麼移植後就能立即與宿主的血液迴圈系統連線，大大縮短缺血時間。”張悅在專案啟動會上提出了這個設想。
趙坤立即著手設計預血管化的實驗方案。“我們需要在類器官培養的早期階段就引入血管內皮細胞，讓它們與功能細胞共同生長，形成天然的血管網路結構。”
團隊決定採用共培養的策略。他們從患者自體幹細胞中同時分化出胰臟細胞和血管內皮細胞，讓這兩種細胞在三維培養體系中共同生長。
“這就像是建造城市時同時規劃道路系統，”易新亮形象地比喻，“而不是先建好城市再挖路。”
然而，最初的共培養實驗並不順利。張悅發現，血管內皮細胞往往聚集在類器官外圍，難以滲透到內部。“內皮細胞傾向於在表面形成血管網路，但類器官中心仍然缺乏血管。”
趙坤嘗試調整培養條件，增加了一些促進細胞遷移的因子，但效果有限。“看來單純依靠化學訊號還不夠，我們需要物理上的引導。”
這時，尹美秋提出了一個從傳統醫學中獲得的靈感：“在中醫理論中，經絡是氣血執行的通道。也許我們可以借鑑經絡的概念，在類器官內部預先建立“氣血通道”。”
基於這個想法，團隊嘗試在類器官培養過程中引入微流控技術。趙坤設計了一種特殊的培養晶片，內部有微細的通道網路，可以引導血管內皮細胞沿著這些通道生長。
“我們在晶片上製造了類似經絡的微通道，”趙坤展示著設計圖，“讓內皮細胞優先在這些通道中形成血管。”
實驗結果顯示，這種方法確實能夠引導血管網路在類器官內部形成。但團隊又遇到了新的挑戰：這些人工引導的血管在移植後能否與宿主血管自然連線？
為了測試這一點，團隊將預血管化的類器官移植到小鼠模型中。透過活體成像技術，他們觀察到這些預形成的血管確實能夠與宿主血管發生連線，但連線效率還有待提高。
“連線點不夠多，而且血流速度較慢，”張悅分析著影像資料，“可能需要促進血管吻合的因子。”
易新亮思考著整體方案：“我們不僅需要血管網路，還需要這個網路具備功能活性，能夠響應血流動力學的變化。”
團隊開始研究如何在預血管化過程中提升血管的功能成熟度。他們發現在培養的最後階段施加脈動流刺激，能夠顯著提高血管的穩定性和功能。
“經過脈動流“訓練”的血管，管壁更厚實，對血流變化的適應能力更強，”趙坤比較著不同組的血管形態學資料，“這就像是給血管做了體能訓練。”
與此同時，尹美秋也在探索針灸對預血管化的輔助作用。她在類器官培養過程中嘗試施加特定的生物電刺激，模擬針灸對氣血執行的調節作用。
“根據古籍記載，適當的電刺激可以促進氣血流通，”尹美秋解釋著她的實驗設計，“也許對血管網路的成熟也有幫助。”
令人驚喜的是，經過生物電刺激的預血管化類器官顯示出更好的血管網路完整性。“看這個三維重建影像，”張悅指著電腦螢幕，“電刺激組的血管分支更加豐富，而且形成了更多的環形結構，這種結構在生理狀態下更穩定。”
團隊開始將各種最佳化條件整合到一起：共培養策略、微流控引導、脈動流訓練和生物電刺激。經過兩週的最佳化，他們成功培養出了高度預血管化的胰臟類器官。
這些類器官不僅內部擁有密集的血管網路，而且功能測試顯示其胰島素分泌能力完全沒有受到影響。“血管網路和功能細胞和諧共存，”張悅興奮地報告，“預血管化沒有損害類器官的功能特性。”
更重要的是，當這些預血管化類器官移植到動物模型後，它們在二十西小時內就建立了充分的血液供應。“造影顯示，移植後一天就有血流貫穿整個類器官，”趙坤展示著超聲影像，“而且血流速度與周圍組織沒有顯著差異。”
為了驗證預血管化的臨床價值，團隊選擇了三位等待胰臟類器官移植的患者進行對照研究。其中兩位接受常規類器官移植，另一位接受預血管化類器官移植。
結果差異顯著：預血管化組患者在移植後第二天血糖就開始穩定下降，而常規移植組需要五到七天才能觀察到類似效果。
“預血管化確實大大加快了功能恢復的速度，”易新亮在病例討論會上總結，“這對改善患者預後具有重要意義。”
然而，團隊也意識到預血管化技術的複雜性可能會限制其廣泛應用。“每個步驟都需要精細控制，”張悅指出，“從細胞比例到培養條件，任何偏差都會影響最終效果。”
趙坤開始思考工藝簡化方案：“也許我們可以開發一體化的培養系統，減少操作環節，提高可重複性。”
尹美秋則從另一個角度提出建議：“如果我們能夠找到關鍵的調控節點，也許不需要這麼多複雜步驟，就能實現有效的預血管化。”
。建重能功的上義意正真現實植移類過——標目的初最近接步步一在正們他，深的究研著隨。礎基定奠建重的雜復更為能可還，題問應供的類型大決解夠能僅不技項這，道知隊團。能可的新了闢開植移類為功的技化管預
