郭一凡是那種不會主動找人說話的人。
將課題組的資料交給林曉看之後,他就坐在自己那張靠窗的工位上。
螢幕亮著,游標停在某一行程式碼的末尾。
己經停了一段時間。
他手裡握著滑鼠,視線落在那行程式碼上,但沒有操作,像是在等什麼。
辦公室裡其他人都在忙各自的事,鍵盤聲此起彼伏,沒有人注意到他坐在那裡。
他低頭看了一眼手機,又放下,抬頭看了看螢幕,又低下頭。
他看了一眼螢幕,又看了看林曉的方向,像是在考慮該怎麼開口。
他猶豫了一會兒,終於拿起手機,給林曉發了一條訊息。
“林老師,方便的時候想請教一個問題。”
訊息發出後,他把手機擱在桌面上,等了一會兒。
過了一會兒,林曉果然走過來。
然後在他工位旁邊停了一下,說:“什麼問題?”
郭一凡抬頭看到他,說:“有個資料處理的邏輯我拿不太準。”
林曉拉了一把椅子在他旁邊坐下:“你說。”
郭一凡把螢幕轉過來一些,指著其中一列資料:“這是我做的那組轉錄組資料。”
“只不過我跑完差異表達之後,發現有一部分基因的表達變化幅度很大,但它們在生物學功能上差別也很大。”
“我想確認一下,我篩選差異基因時用的閾值是不是太寬了,還是說我應該在篩選之前先做一次額外的標準化?”
林曉低頭看了一會兒螢幕,心裡卻是點點頭。
果然不愧是國家重點實驗室的博士生,這個能力還是線上的,問的問題還是有點水平。
他先看了看資料的整體分佈,又看了一眼樣本的分組標記,然後問了一句:“你做歸一化的時候,用的是哪套流程?”
“用的是標準流程,沒有額外做修正。”
林曉點了點頭:“那你先看看這些高表達差異的基因,在樣本之間是不是存在系統性的分佈偏倚。”
郭一凡按照他說的操作了一下。
螢幕上跳出一張箱線圖,分佈模式看起來與預期不太一致,上下限的跨度比預期的更寬一些。
“……確實有偏倚。同一個樣本里,不同基因的表達量差異也比較大。”
“這個偏倚不一定是實驗操作的問題,”林曉說:“但如果你不確定它來自哪個環節,可以先在差異表達分析之前加一步額外的校正。”
“我推薦你用那套帶協變數調整的標準化方法,它能根據己知的批次資訊和樣本分組資訊自動調整表達量的基線,把跨組差異中可能存在的干擾因素分離出來,然後再進行差異篩選。”
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