林雪說完,又從旁邊的二氧化碳培養箱裡端出一板六孔的細胞培養板,湊到倒置顯微鏡下面看了幾眼,隨後便側過身,把位置讓給了齊盛。
“過來看看,現在這個狀態,叫細胞匯合度八成滿。說白了,就是貼在板子底下的細胞,鋪滿了百分之八十的面積。”
她指了指目鏡。
“太稀了,細胞活性差。太密了,它們自己就搶營養,狀態也不好。剛好八成的時候做基因編輯,效果最穩定。”
齊盛愣了一下,隨即連忙湊上前去,學著她的樣子,眼睛對準顯微鏡的目鏡。
裡面是密密麻麻的一片,具體什麼樣他也看不懂,畢竟是第一次。
但這不代表他聽不懂,書上都寫過這些理論,今天總算是見到活的了。
他正對著顯微鏡傻樂,另一邊的陳飛突然喊了一聲:“齊盛,你過來一下,幫我拿一下左邊檯面上那瓶PBS緩衝液。”
齊盛聞言,趕緊跑了過去,小心翼翼地拿起那瓶貼著PBS標籤的試劑,遞了過去。
陳飛兩隻手都沒空,正拿著兩支試劑管,不知道在除錯著什麼。見到齊盛過來,他也沒著急,手裡的動作沒停。
齊盛就這麼舉著瓶子,站在旁邊等著。
過了一分多鐘,陳飛終於操作完了手上的步驟,這才接過齊盛遞來的PBS緩衝液。
他拿起一根長柄的巴氏吸管,先是吸走培養板孔裡的舊培養基,然後將PBS緩衝液輕輕地注進去,晃了晃,再把PBS全部吸走倒掉。
“這步叫棄上清,加PBS潤洗。”
他一邊操作,一邊給齊盛解釋。
“PBS就是無菌的生理鹽水,跟衝碗似的,作用是把細胞代謝的廢物、還有舊培養基裡殘留的血清都衝乾淨。”
他頓了頓,看了看齊盛一臉老師傅的表情,又多解釋了一句:“後面的轉染試劑會受到血清的干擾,不衝乾淨的話,編輯效率能首接掉一半。”
齊盛若有所思地點了點頭。
等陳飛把六個孔全都潤洗完畢,他才輕輕吐出一口氣。
“咱們今天要做的,是CRISPR/Cas9介導的MSTN基因敲除。”
他指尖點了點桌上第一管透明的液體。
“這管是質粒,裡面裝了兩個關鍵的東西:一個叫sgRNA,相當於導航,我們提前編好了它的序列,它能專門盯著咱們要剪的目標基因。”
“另一個叫Cas9蛋白,它就是一把基因剪刀,會跟著導航走,找到位置就咔嚓一下,精準剪斷。”
他又換了個新的槍頭,往管子里加入另一種叫轉染試劑的液體。
“MSTN基因,你可以理解成是控制肌肉生長的‘剎車’。人天生就帶著這玩意兒,怕肌肉長得太猛,把能量都耗光了。”
“咱們現在要做的,就是把這個‘剎車’給它剪壞,讓它失靈。這樣一來,理論上不用玩命練,肌肉的力量和耐力也能往上漲一大截。這東西,就是軍用人體強化技術的基礎靶點之一。”
旁邊正在整理試劑的林雪聽到了,抬頭插了句嘴,語氣裡有點無奈。
“原理聽著是簡單,我們倆就卡在這兒快兩個月了。現在的編輯效率,就死死卡在百分之三十,怎麼都上不去。十個細胞裡,最多三個能成功被剪對。”
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